Главной святыней Рождественской обители была Тихвинская икона Пресвятой Богородицы. В XIX веке икона находилась в иконостасе Рождественского собора, по левую сторону Царских врат
Икона с частицами мощей святых проподобномучениц Елисаветы и Варвары
Одна из значимых святынь алапаевского Елизаветинского монастыря – икона с частицами мощей святых пропродобномучениц Елисаветы Феодоровны и Варвары (Яковлевой). Они были привезены из Иерусалима настоятельницей алапаевскогй обители матушкой Олимпиадой (Тетеркиной) в 2007 г.
Каждый четверг в Мемориальной комнате Напольной школы служится молебен с акафистом святой Елисавете. Сестры верят, что их молитвы подкрепляются неиссякаемой Божией благодатью, а также незримым присутствием самой Великой княгини.